科普UP 丨 当细胞掉进“颜料盘”,会发生什么?

2025-04-22
24
正文字体:

在我们身体里,每个细胞都是一座蕴含无数奥秘的小宇宙。然而,这些细胞尺寸大多在微米级别,且十分透明,在显微镜下就像是一张张黑白照片,过去科学家们很难分辨其结构与细节。直到细胞染色技术出现,才为这个微观世界带来明亮光彩,让我们得以一探究竟。

显微镜下未染色的细胞。图片来源:Stain-iT

在这之中,有个叫小A的细胞,即将开启一段充满未知的奇幻 “变身” 之旅。

图片来源:《工作细胞》

 

01  “变身”前奏:中了“彩”票的运气

细胞小A生活在细胞培养室的一个培养皿里,周围伙伴众多。这一天,它莫名有种异样的感觉。身着白大褂的科研人员小李手持滴管,在众多培养皿间专注观察。

细胞小A浑身瑟瑟发抖,内心满是不安;小李则轻轻拿起细胞小A所在的培养皿……

就这样,细胞小A带着紧张与期待,迎来了它奇幻之旅的开端……

 

02  染色危机:披上色彩的 “外衣”

小李将细胞小A所在的培养皿拿到实验台,这里摆放着各类染料试剂瓶。细胞小A瞧见小李拿着奇怪的瓶子,满心恐惧,在培养液里拼命挣扎。

小李将调配好的 MitoTracker 染料缓缓滴入培养皿,瞬间,细胞小 A 被染料团团围住!

说话间,小李把培养皿放入了温暖的培养箱。

渐渐地,细胞小A察觉到,身体里有东西“微妙”地和自己逐渐融合在了一起……

 

在细胞染色技术中,染色环节至关重要。科研人员会根据要观察的细胞结构挑选对应的染料。比如观察细胞核用 DAPI,线粒体用 MitoTracker 系列染料,细胞膜用 Dio 等。

不同染料有特定工作浓度,需精确配置。以线粒体染色为例,将配置好的 MitoTracker 染料加入细胞培养液中,使其达到工作浓度,然后将细胞继续置于培养箱中孵育 30 分钟到 1 小时不等。

期间,染料会利用线粒体独特的膜电位,主动进入线粒体内部并与特定成分结合。其他结构的染色操作类似,只是染料种类和孵育时间有所不同。像 DAPI 染色细胞核,一般孵育5-15分钟即可。

染色完成后,需用缓冲液清洗细胞,去除未结合的染料,以免干扰后续观察。

 

03  冲洗 “烦恼”:洗净多余的色彩

一段时间后,小李从培养箱中取出培养皿,准备清洗细胞。

冲洗步骤是为了确保后续观察的准确性,去除那些未与细胞结构有效结合的染料,让细胞结构在后续观察中能更清晰地展现出来。

 

04  固定 “定格”:为微观世界留存影像

小李拿起多聚甲醛固定剂瓶,准备往培养皿里加。

 

 

固定过程中,多聚甲醛会与细胞内的蛋白质等生物大分子发生交联反应,从而稳定细胞结构,使得细胞在染色后的形态和结构得以保存,为后续的观察和研究提供稳定的样本。

固定后的细胞样本,将进入上机检测阶段。显微镜会逐点或逐区域扫描样品,通过探测器收集细胞发出的荧光信号,最终生成细胞的染色图像。

图片来源:zeiss.com/microscopy/zh/home.html

至此,细胞小A被成功染色。那么问题来了,科研人员是如何观测并分析不同颜色的细胞结构?各种染色图像会释放出什么样的信号,对病理诊断、药物开发与治疗发挥怎样的作用呢?

 

05  揭秘时刻:让不同颜色的细胞结构开口“说话”

细胞核作为细胞的 “智慧中枢”,犹如藏着生命蓝图的神秘图书馆,密密麻麻的 DNA 链记录着遗传密码,指挥着细胞的一举一动。线粒体则是不知疲倦的 “能量发电站”,通过复杂的化学反应将营养转化为细胞能利用的能量货币 ATP,为细胞的各类生命活动供能。细胞膜似坚固的城墙,精准调控物质进出,守护着细胞内部的 “小世界”,维持内环境稳定。细胞骨架宛如建筑的钢筋架构,赋予细胞特定形状,在细胞运动、分裂等关键进程中发挥着不可或缺的作用。

图片来源于网络

 

 细胞核染色:精准定位遗传密码 

细胞核的染色,科学家们常常选用 DAPI 染料,它堪称 “分子导航员”。DAPI 能精准地 “嗅出” 细胞核中 DNA 的位置,一头扎进 DNA 双螺旋结构的小沟里紧密结合。当特定波长的光照射时,DAPI 瞬间被激活,发出明亮的蓝色荧光,细胞核的形态、位置以及内部染色质的分布便清晰可见。通过这种染色方法,科研人员能清晰分辨出细胞核是圆润饱满,还是出现了病变时的皱缩变形,为研究细胞的生长、分化以及疾病的发生发展提供重要线索。

细胞核染色。图片来源:Stain-iT

 

 线粒体染色:追踪能量工厂的动态 

线粒体染色采用的 MitoTracker 系列染料,是线粒体的 “专属追踪器”。线粒体具有独特的膜电位,MitoTracker 染料能够利用这一特性,主动被线粒体摄取进入内部。一旦进入,它们就与线粒体中的特定成分紧紧相拥。在合适的光激发下,线粒体瞬间 “点亮”,根据染料种类的不同,发出鲜艳的红色或绿色荧光。科研人员借此可以观察线粒体在细胞内的分布情况,是整齐有序地排列,还是在病变时变得杂乱无章;还能通过荧光强度的变化,推测线粒体能量代谢活动是活跃还是衰退,为研究细胞的能量供应和代谢相关疾病提供关键信息。

图片来源:PMID 37956476

细胞核、线粒体染色。图片来源:Stain-iT

 

 细胞膜染色:勾勒细胞的边界轮廓 

细胞膜的染色相对复杂一些,因为细胞膜结构特殊且功能多样。以 Dio 染料为例,它具有亲脂性,能够巧妙地嵌入细胞膜的脂质双分子层中,在显微镜下,细胞膜呈现出绿色的轮廓,清晰地勾勒出细胞的外形。不仅如此,通过标记细胞膜上的特定分子,如受体、离子通道等,科研人员可以研究细胞膜的流动性、物质运输机制以及细胞间的信号传递过程,深入了解细胞与外界环境的交互作用。

细胞核、细胞膜、线粒体染色。图片来源:Stain-iT

 

 细胞骨架染色:揭示细胞内部的支撑体系 

细胞骨架中的微丝染色,主要依靠鬼笔环肽这一神奇工具,鬼笔环肽能特异性与微丝中肌动蛋白单体紧密结合,使微丝在荧光显微镜下呈现出错综复杂的网络状结构,发出绿色荧光;而细胞骨架中的微管则可通过特异性抗体标记,其主要参与细胞内物质运输、有丝分裂时纺锤体的形成等重要过程。科研人员通过观察微丝与微管的排列方式和动态变化,可以研究细胞的形态维持、运动迁移以及细胞分裂时的胞质分裂等过程,揭示细胞内部强大支撑系统的奥秘。

微丝、微管

细胞核、微丝、微管染色。图片来源:Stain-iT

 

 染色技术助力攻克神经系统疾病 

在科研工作中,细胞染色技术发挥着不可替代的重要作用。以攻克一种神秘的神经系统疾病为例,患者逐渐出现认知障碍和运动功能失调等症状,严重影响生活质量。科学家们利用细胞染色技术,对患者的神经细胞展开深入研究,利用细胞染色所发现的问题针对性地研发药物,为治疗这种神经系统疾病带来希望。

图片来源:《工作细胞》

细胞小 A 的 “变身” 之旅,正是细胞染色技术应用的一个小小缩影。这项技术就像一把神奇的钥匙,为我们打开了深入了解细胞微观世界的大门。它在科研和医学领域的广泛应用,帮助我们不断探索生命的奥秘,攻克各种疾病难题,为人类健康事业的发展做出巨大贡献。随着技术的不断进步,相信未来它将为我们揭示更多细胞世界的未知秘密,让我们对生命的理解更加深入和全面。

 

 

部分图片来源于网络

撰稿:周渊-生物界面团队